无菌检测是针对无菌医药产品、无菌医疗器械等无菌产品的一项关键检测工序，其核心目的在于精准确认上述产品是否混入污染性微生物。在实际应用中，无菌检测聚焦于生产流程，通过对每一批次无菌产品的细致检测，严谨判断其是否符合放行标准。这使得无菌检测成为无菌产品在出厂前，保障其质量合格的基础性且不可或缺的质量控制环节，同时也是筑牢无菌产品安全防线的关键所在，从多方面确保无菌产品的安全性与可靠性，为相关产业的稳健发展提供坚实支撑。

无菌检测的主要方法如下：

①直接接种法：把样品直接接种于培养基中，观察有无微生物生长，适合液体样品检测。

②薄膜过滤法：先将样品通过滤膜过滤，再把滤膜放于培养基上培养，观察微生物生长状况，适于大体积液体样品检测。

③快速微生物检测法：借助荧光标记、PCR技术等现代生物技术，能快速检测样品中的微生物。

④无菌隔离器法：在无菌隔离器中操作，防止外界污染，适合高风险样品检测。

以上方法各有优缺点，选择时要综合考虑样品性质、检测要求及实验室条件。

下面我们将重点介绍薄膜过滤法在无菌检测中的应用，该方法能有效规避无菌检测中的常见问题和风险，帮助您高效、安全且合规地完成无菌检测工作。

初步准备

①确保对所有设备及无菌检测耗材和组件进行适当的消毒。赛多利斯

Sterisart无菌检测泵的所有部件都易于拆卸，便

于进行高效的灭菌。

②在无菌条件下打开无菌包装。

③注：建议在较高等级的无菌处理系统中进行无菌试验，最理想的是位于受控的环境中的隔离器，或位于

B级洁净室

内的

A级层流柜。

④通过集菌仪上的条码扫描器采集并记录所用滤筒和试剂的信息。

⑤将集菌培养器（滤筒）牢牢固定在排水盘插座中，确保其不会晃动。

⑥确保滤筒底部的出水口塞子和无菌通气口盖子在滤筒附近

⑦将集菌培养器的管子固定在泵上的转子轨道上。适当调节进出转子两侧的管子的长度，确保两侧有足够的管子

滤膜预润湿

使用少量冲洗液（仅需几毫升）对滤膜进行简单预润湿。建议在此步骤将泵速设置为低速（速度设置为50）。操作时，可选择以下两种方式：

1. 将无菌通气滤器盖子堵住通气口，使冲洗液直接通过滤膜过滤掉；

2. 去掉通气滤器盖子，保留少量冲洗液，随后再堵住通气口，过滤掉冲洗液。

产品过滤

根据药典要求测试相应的产品批次数量。速度设置要视取样产品的类型而定。

1、

用通气滤器盖子封闭无菌通气口，这样样品可以直接通过膜过滤掉（即过滤后不进行保留在培养器里面）

2、

直立样品容器，确保为每个不同的样品类型选择正确的集菌培养器滤器型号（参见我们的无菌检测滤筒选择指南，或联系我们技术团队索取）。握住针头保护屏，向下按压针头刺穿样品容器。

3、

开启设备。

4、

在泵运行几秒后，倒置容器并将其放在瓶架上（如果是可折叠袋，则放在夹袋器上）。

5、

按照药典或内部的SOP的要求过滤相应体积的液体。请参阅药典的最小试验体积建议。一般情况下，不需要过滤所有样品瓶中的液体，保留一定的样品剩余体积。

滤膜冲洗

①

打开通气滤器盖子。

②

直立放置冲洗液，集菌培养器上的针头刺穿容器的隔膜或表面。手握住针头保护屏的位置，向下按压针头。

③

开启无菌检测泵。

④

在泵运行几秒后，倒置冲洗液容器并将其放在无菌检测泵的瓶架上。这样有利于液体通过Y形接头均匀分布。

⑤

装入50-100 ml液体到培养器滤器

注意：不得超过100 ml刻度。给培养器中装入过量液体会导致通气滤器堵塞，并会妨碍通气，从而影响无菌试验

⑥

盖上通气滤器盖子并用膜过滤掉冲洗液。

⑦

根据需要重复此步骤

⑧

冲洗结束后，打开通气滤器盖子

装入培养基

一些供应商的培养基可能比其他品牌的培养基的颜色暗。最好选择易于观察到变化（即浑浊度）的培养基。

培养、检验和读数

根据药典规定的温度将一次性集菌培养器培养14天：

TSB：

20 - 25 °C

FTM：

30 - 35 °C

每3-5天对培养器定期检查一次。

如果在生长14天后观察到培养基无变化，那么产品无菌且该无菌产品适合放行。如果目视观察到变化（如，浊度变化），则说明存在微生物生长，试验为阳性，应对其中的根本原因进行详细的分析。

只有当明确证明观察到的微生物生长/污染与所检查的产品无关时，该试验才可能被视为无效并且需要重复试验。一般情况下，在重复进行试验之前，必须采取纠正措施。无菌试验只能重复一次。如果在重复进行的试验中检测到污染，则说明产品不符合要求，且整个批次应被拒收。

在无菌检测实验中，采用了薄膜过滤法，并使用了赛多利斯（Sartorius）的Sterisart Universal第四代无菌检测泵。这是一款专为屏障技术环境设计的无菌蠕动泵，能够将样品和培养基精准且无污染地转移至Sterisart滤筒中进行无菌检测。Sterisart Universal系统集成了先进的硬件与直观的软件，确保检测过程的安全性、合规性和高效性。其特点包括灵活的连接性、远程操作功能、优化的用户界面，以及符合21 CFR Part 11标准的无纸化报告软件，进一步提升了无菌检测的操作便捷性和数据可追溯性。赛多利斯Sterisart Universal无菌检测泵凭借其卓越的性能和智能化设计，成为无菌检测领域的理想选择。