streptavidin-Acrylamide,链霉亲和素修饰丙烯酰胺的化学组成与结构
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2025-07-04 00:00:33
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Streptavidin-Acrylamide 是链霉亲和素(Streptavidin)与丙烯酰胺(Acrylamide)通过化学键连接形成的复合物,结合了链霉亲和素的高生物素亲和性和丙烯酰胺的化学修饰特性,在生物分子标记、纯化、检测及药物递送等领域具有重要应用价值。以下是对其的详细介绍:

一、化学组成与结构

链霉亲和素(Streptavidin):

  • 来源:源自阿维丁链霉菌(Streptomyces avidinii)的蛋白质。
  • 结构:由四个相同的亚基组成的四聚体蛋白,分子量约为66 kDa。
  • 特性:每个亚基能特异性结合一个生物素分子,与生物素的结合力极强,解离常数约为 10−14 至 10−15M,且非特异性结合远低于亲和素(Avidin)。

丙烯酰胺(Acrylamide):

  • 性质:一种常见的有机化合物,常用于合成高分子材料和作为化学交联剂。
  • 作用:通过化学键与链霉亲和素连接,为复合物提供化学修饰的可能性,并可能增强其化学稳定性。

streptavidin-Acrylamide,链霉亲和素修饰丙烯酰胺

二、核心特性

  1. 高亲和性:链霉亲和素与生物素之间的结合力极强,使得复合物在生物分子标记、纯化和检测中具有很高的应用价值。
  2. 化学稳定性:丙烯酰胺的引入可能增强了链霉亲和素的化学稳定性,使其在某些极端条件下仍能保持稳定。
  3. 可修饰性:丙烯酰胺作为一种活性基团,为链霉亲和素提供了更多的化学修饰可能性,从而拓展了其应用范围。

三、应用领域

生物分子标记:

  • 利用链霉亲和素与生物素之间的特异性结合能力,可以将复合物用于生物分子(如蛋白质、抗体、核酸等)的标记,便于后续的亲和纯化和检测。
  • 例如,在流式细胞术、质谱分析、活细胞成像等实验中,通过生物素标记目标分子,再利用链霉亲和素-丙烯酰胺复合物进行捕获和检测。

生物传感器:

  • 复合物可用于构建生物传感器,实现对生物素或其他相关分子的高灵敏检测。
  • 例如,将复合物固定于传感器表面,通过与目标生物分子结合引起物理或化学性质变化,从而实现检测。

药物递送:

  • 在药物递送系统中,复合物可以作为靶向递送载体,通过特异性结合生物素修饰的药物分子,提高药物的靶向性和生物利用度。
  • 例如,将药物分子与生物素连接,再通过链霉亲和素-丙烯酰胺复合物实现靶向递送。

样本制备与纯化:

  • 复合物是许多纯化系统的核心组成部分,可用于从复杂样品中分离纯化生物素标记的核酸、抗体、蛋白或相关复合物等。
  • 例如,在免疫沉淀(IP)、细胞分选、DNA-蛋白相互作用研究等实验中,复合物可作为特异性捕获工具。

四、操作与存储

  • 存储条件:应储存在-20℃以下的低温、干燥、避光环境中,以保持其稳定性和活性。避免频繁解冻和冷冻,以防止性质发生变化。
  • 操作安全:在使用过程中,应穿戴适当的防护装备(如实验服、手套和护目镜),以避免与皮肤或眼睛直接接触。同时,应注意遵守实验室安全操作规程,防止意外事故的发生。

温馨提示:仅用于科研,不能用于人体!

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