&核心结构

核心元件：

融合蛋白：编码 GAL4 DNA结合域（DNA-BD） （a.a. 1-147）与 小鼠p53蛋白（a.a. 72-390）的融合蛋白。

启动子：ADH1启动子，驱动融合蛋白的高水平表达。

标签：c-Myc表位标签，用于抗体检测融合蛋白。

克隆位点：多克隆位点（MCS），含多种限制性内切酶位点（如 EcoRI, BamHI, SalI 等），便于插入外源基因。

筛选标记：

原核抗性：卡那霉素（Kanamycin）抗性基因，用于大肠杆菌筛选。

真核抗性：TRP1 基因，用于酵母转化子的色氨酸缺陷培养基筛选。

复制起点：

pUC ori：大肠杆菌复制起点。

2μ ori 或 f1 ori：酵母复制起点。

其他元件：T7启动子（用于体外转录）、终止子（ADH1/T7）。

载体大小：约 8.3 kb（因插入p53片段，大于基础载体pGBKT7的7.3 kb）。

功能与作用机制

阳性对照作用：

表达 GAL4 DNA-BD-p53 融合蛋白，与另一载体 pGADT7-T共转化酵母后，p53与T抗原发生已知相互作用，激活报告基因表达，作为实验系统的阳性对照。

诱饵载体功能：

可替换p53插入片段，克隆目标蛋白（bait），研究其与文库蛋白（prey）的相互作用。

检测便捷性：

c-Myc标签可通过抗体验证融合蛋白表达。

试剂信息

英文名称：pGBKT7-53 Vector 酵母双杂交对照载体

载体类型：酵母双杂交系统载体

载体大小：8.3kb

原核抗性：Kanamycin, Kan

克隆菌株：DH5α

载体标签：c-Myc

筛选标记：TRP1

启动子：ADH1

表达宿主：酵母细胞

5'测序引物：T7: TAATACGACTCACTATAGGG

3'测序引物：根据序列设计引物

纯度：≥95%

储存条件：-20℃避光干燥

生产厂商：西安强化生物科技

&应用领域

酵母双杂交系统验证：

阳性对照：与pGADT7-T配对，验证系统可靠性。

假阳性排除：对比阴性对照区分非特异性相互作用。

蛋白质相互作用研究：

作为基础载体，插入目标bait基因，筛选互作蛋白。

用于验证特定蛋白互作。

载体效应研究：

探索半抗原-载体耦联对抗体产生的影响，揭示T细胞依赖性抗原的分子机制。

技术扩展应用：

用于酵母单杂交、三杂交系统。

支持体外转录/翻译。

&相关试剂

Aureobasidin A

(±)-Jasmonic acid

pGBKT7 Vector

Zeatin Riboside

pGBKT7-53 Vector

pGBKT7-Lam Vector

Lewis-X(Lex)Trisaccharide

Lewis-A (Lea) Trisaccharide

Blood Group A Trisaccharide

YPD Agar Medium YPD琼脂培养基

Rosetta (DE3) Competent Cell

TB1 Chemically Competent Cell

CopyCutter Induction Solution

Ribonuclease A (RNase A) from Bovine Pancreas

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本试剂用于科研领域，其他用途概不适用！